光療，包括光熱療法（PTT）和光動力療法（PDT），依靠化學光敏劑（PSs）吸收近紅外光（NIR）的能量，產生大量的熱量或單線態氧（1O2），對生物分子造成不可逆的損傷，從而導致**細胞凋亡。光療以其無創性、**性、時空控制、對健康組織低毒等諸多優點，在****領域備受關注。然而，由于熱能分布不均和**乏氧環境的影響，它不能完全消融**細胞，存活下來的**細胞可誘發局部復發或遠端轉移。通過光療和化療的聯合，可以將殘留的**細胞摧毀，從而阻止**的復發和轉移（圖1）。

圖1. HA修飾共載NIR770/DOX納米粒子用于**靶向協同診療一體化

刺激響應性**載體系統能對諸如pH、ROS、GSH、溫度、酶和近紅外光等外界刺激因素產生反應，可以介導**在病灶部位特異性釋放，從而**的提高**的**效率和降低潛在的毒副作用。

絲素蛋白是天然高分子生物材料，具有優良的生物相容性。一種結合**癥成像示蹤與靶向**的診療一體化納米雞尾酒療法，將具有線粒體靶向功能的ICG類似物（NIR770）和抗****阿霉素（DOX）共載于絲素蛋白納米粒子中，并利用透明質酸（HA）對其表面進行功能化修飾。

納米粒釋放實驗表明，所獲得的納米粒子HNDNPs具有明顯的酸性pH、H2O2、GSH、高溫和透明質酸酶（HAase）五重刺激響應性。進一步的研究發現，絲素納米粒子中富含由肽段間氫鍵維系的β-折疊片層結構和二硫鍵，這些化學鍵共同維持絲素納米粒子的穩定性[2-3]。

氫離子、ROS和高溫能破壞維系β-折疊穩定的氫鍵，GSH能打斷絲素粒子內部的二硫鍵，而HAase則降解粒子表面的HA層。正是由于粒子表面HA層或內部起穩定作用的化學鍵遭到破壞，致使納米粒子成為疏松的體系，于是表現出明顯的pH/ROS/GSH/高溫/HAase刺激響應性（圖2）。

圖2. 納米**的多重刺激響應性評價

通過吞噬實驗發現，與表面未修飾載DOX的納米粒子（DNPs）相比較，**細胞對HA表面修飾載DOX的納米粒子（HDNPs）具有更高的吞噬效率。當在培養基中加入游離HA分子后，細胞對HDNPs的吞噬效率**下降。

NIR770在細胞內釋放后，會因為其自身的親脂性和強正電性而積聚在線粒體周圍，同時DOX分子則富集于細胞核內。體外抗**實驗數據顯示，在NIR照射下，HNDNPs表現出明顯的光熱、光動力和化療協同**效果。

隨后的小動物活體成像和光聲成像的實驗數據顯示，HNDNPs能特異性富集于**組織中。從**組織冰凍切片的熒光染色圖片可以觀察到納米**彌散在整個**組織，驗證了HNDNPs具有**的**滲透性能。體內抗**實驗結果表明，在NIR照射下實現了**的多模態成像指導下的PTT- PDT和化療協同**，具有比單一療法更好的**效果（圖3）。

圖3.體內抗**效果

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zzj 2021.3.9