免疫磁珠細胞分選即磁珠分選技術常見問題

磁珠分選，也被稱為免疫磁珠細胞分選，包括使用針對特定細胞表面抗原的抗體標記細胞進行選擇或去除。被標記的細胞與磁珠交聯，一旦被置于磁場中，即可被吸附。

由于其快速性和簡便性，磁珠分選是科學家分離高純度的特定細胞亞群較常用的方法之一。

關于磁珠細胞分選的常見問題

1. 應該使用磁珠分選還是流式分選？

磁珠分選和流式分選（FACS）是較常用的兩種分離特定細胞群的方法。兩種方法的選擇取決于您將進行何種下游應用。

相對于復雜的流式分選，磁珠分選：

簡單、快捷，較快8分鐘就可以完成分選，獲得目的細胞

無需昂貴精密的儀器，在生物安全柜即可做到無菌分選

沒有高壓液流和激光對細胞的損傷，分選的細胞活性更高

無需**人員操作，無需預約排隊，可自主安排時間

當然，磁珠分選和流式分選也可結合使用。在進行流式分選前，使用磁珠分選技術預富集您的樣本，能縮短細胞分選的時間、提高細胞活性，特別是在樣本量較大或需要分選稀少的細胞類型時。

2. 應該選擇有柱式還是無柱式的磁珠分選方法？

免疫磁珠分選有兩種方式：有柱式分選和無柱式分選。

所謂有柱式磁珠分選，即被磁珠標記的細胞需要流經一個置于磁場內的分離柱從而實現對目的細胞分離的過程。這個分離柱內由一些微小鐵珠構成，當這些鐵珠被置于磁場中時會被磁化，從而產生一個可吸附被磁珠標記的細胞的局部磁場。當使用正選時（圖1），未被磁珠標記的非目的細胞可以通過分離柱，而被磁珠標記的目的細胞則保留在分離柱中。當將分離柱移出磁場后，可通過緩沖液洗脫得到目的細胞。

然而在有柱式磁珠分選流程中，需要多次的洗滌細胞以避免分離過程中的交叉污染，并且每次分選時都需要更換新的分離柱，因此這種分選方法使得實驗成本更高，實驗流程更復雜，且費時費力。此外，因為堵柱子而損失珍貴樣本的情況在有柱式磁珠分選的過程中非常見，特別是當使用的組織樣本含有大量的細胞碎片時。

圖1. 有柱式磁珠分選的正選操作流程

所謂無柱式磁珠分選，即直接將被磁珠標記的樣本置于磁場內從而實現對目的細胞分離的過程。被磁珠標記的細胞由于磁場的作用被吸附在試管壁上。而未被標記的細胞則可通過傾倒出或移液器吸出。將試管移出磁場后，被標記的細胞則會從試管壁上脫離，懸浮于試管內。當使用正選時（圖2），被標記的目的細胞被留在試管內，可立即用于下游應用。

圖2. 無柱式磁珠細胞分選的正選操作流程

3. 應該選擇正選還是負選？

磁珠分選又分為正選和負選（圖3）。在選擇磁珠分選方法前，我們先來了解什么是正選，什么是負選。

免疫磁珠陽性分選，也被稱為正選，是指使用抗體偶聯磁珠來標記目的細胞以達到將其收集的目的。樣本在磁極中孵育后，由于抗體與磁珠相連使得被標記的細胞保留在試管中。正選具有以下特點：

分離的細胞純度高

分離的細胞通常與抗體和磁珠相連

抗體混合物可與目的細胞表面特定的標記相連

可從負選后的細胞中分離其他細胞群

免疫磁珠陰性分選，也被稱為負選，是指使用抗體偶聯磁珠來標記非目的細胞以達到將其去除的目的。樣本在磁極中孵育后，由于抗體與磁珠相連使得被標記的非目的細胞保留在試管中，而目的細胞則可通過傾倒或移液器吸出來收集。目的細胞沒有結合特異性抗體，因此無法被磁珠標記。負選具有以下特點：

目的細胞未被磁珠標記

較小化樣本處理步驟從而使得操作流程更快更簡單

抗體混合物只結合所有非目的細胞

圖3. 無柱式磁珠細胞分選中負選與正選的操作流程

選擇正選或負選進行細胞分選實驗取決于您的下游應用。對于大部分的下游應用，正選中被標記了抗體和EasySep?磁珠的細胞并不會影響下游實驗。更不會激活細胞。

產品供應：

功能化磁珠    羥基磁珠    

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甲苯磺酰基磁珠    

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免疫檢測磁珠及配套試劑    羧基磁珠    

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ALP堿性磷酸酶化學發光底物    

Flag標簽抗體磁珠    

GST標簽蛋白純化磁珠（GSH磁珠）    

His-tag標簽蛋白純化磁珠（鎳磁珠）    

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StrepTactin磁珠（純化Strep tag II標簽蛋白）    

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電化學發光鏈霉親和素磁珠    

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進口品牌磁珠    羧基磁珠/Agliant鏈霉親和素磁珠    

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CD31抗體磁珠    

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Flag標簽抗體磁珠    

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