外泌體標記親脂性染料PKH-67(green)/PKH-26(red)
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有**的脂質雙分子層結構;參與細胞之間的交流,物質的運輸以及正常生理過程的維持,此外還與疾病的產生有關。
對分離的外泌體進行體外標記或活體示蹤,有助于對外泌體的功能進行進一步的研究。目前對于外泌體的標記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。
外泌體染色的方法。
親脂性染料:PKH-67(green)/PKH-26(red)
染料可以穩定的與細胞膜脂質區結合并發出熒光,主要用于細胞體外標記、體外細胞增殖研究以及體內外的細胞示蹤研究。PKH67的體內熒光半衰期為10-12天。
相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,標記在兔紅細胞上的PKH26半衰期長達100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內細胞跟蹤研究。
將PKH67標記的神經細胞外泌體與b.End3 細胞共培養后的熒光圖
親脂性羰花青染料(carbocyanine dyes):DiI/DiD/DiO/DiR
DiI, DiO, DiD, DiR是一系列親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。這些環境敏感性熒光染料在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強。且具有消光系數高、極性依賴性、激發態壽命短等特點。一旦進入細胞膜后,可在整個細胞膜上擴散,**濃度時可以使整個細胞膜染色。
將DiI標記的外泌體注射入小鼠海馬齒狀回(DG)區,分別觀察第3、6和20天的熒光結果,對比可以發現外泌體在皮質層發生了很大的遷移。
DiD
將DiD標記的外泌體與PC12細胞孵育3H后,共聚焦觀察。
DiR
體內靜脈注射DiR標記的外泌體,24H后進行成像觀察,結果如上圖所示。
DiO
使用ExoChip-chambers捕獲不同樣品中的exosome,然后使用DiO進行外泌體染色,通過觀察熒光的強弱對不同來源樣品中的外泌體進行定量分析。
產品供應:
上述產品與相關檢測、分離、抽提等相關服務均可提供,僅用于科研機構!
wyf 01.14