點擊化學DBCO修飾蛋白/多肽/糖肽/小分子/抗體

點擊化學(Click chemistry)，又譯為"鏈接化學"、"速配接合組合式化學

二苯并環辛炔（ADIBO，DBCO）是用于應變促進的炔疊氮化物環加成（spAAC）（一種無銅Click化學反應）的最具反應性的環炔。

這是一種胺反應性NHS酯，可將反應性部分輕松連接至幾乎任何伯或仲胺基團，例如蛋白質，肽或小分子胺基團。

DBCO立即與疊氮化物反應。該反應速率遠高于銅催化的反應速率以及與許多其他環辛炔的反應速率。與某些其他環辛炔不同，DBCO不與四嗪發生反應-這允許疊氮化物與DBCO和反式環辛烯與四嗪進行正交共軛。

基于疊氮-炔環加成反應的點擊化學，被廣泛應用于有機化學、**化學、化學生物學、分子生物學、細胞生物學等多學科領域。銅催化疊氮-炔點擊化學反應是一類**的生物正交反應，但銅催化體系在生物體系中具有較差的生物相容性。環張力炔基如DBCO、BCN等可以在無銅催化的溫和條件下實現疊氮-炔基的環加成，**地促進了點擊化學在活生物體系中的應用。

環張力炔基DBCO結構可以在酸性條件下重排喪失其點擊化學反應活性。通過研究發現，銀試劑AgNTf2或AgOAc可以在中性條件下促進DBCO快速重排生成四環產物，并且當反應體系有胺類化合物時，會發生轉酰胺反應，形成新的酰胺產物。在此過程中，銀試劑催化轉酰胺反應具有“籠縛”酰化試劑屬性：無催化劑條件下其酰化活性“束縛”在DBCO“籠狀”結構中，而在銀催化下從“籠”中釋放其酰化能力。在與疊氮基團的競爭反應中，銀試劑催化轉酰胺反應效率遠高于疊氮點擊化學反應，酰化產物產率高達95%。我們選擇了不同的含有氨基的小分子化合物、多肽、糖肽、蛋白、糖蛋白等，對該反應進行了底物反應活性和選擇性的探索。

研究發現，銀催化條件下，DBCO可以快速的酰化氨基官能團；針對三種包含20種天然氨基酸的多肽底物的研究發現，DBCO酰化反應高選擇性地發生在Lys的氨基上，而不影響其他氨基酸。同時，銀催化DBCO酰化反應可以**地修飾糖肽、BSA蛋白、糖蛋白RNase B和IgG抗體等，表現出較好的底物適用性。

二：原理

點擊化學反應主要有4 種類型

1.環加成反應

2.親核開環反應

3.非醇醛的羰基化學

4.碳碳多鍵的加成反應

目前文獻報道廣泛應用的點擊反應(click reaction)是通過Cu ( Ⅰ ) 催化，炔基與疊氮基發生環加成反應，生成區域選擇性的1,4-二取代-1,2,3-三氮唑，其反應機理如圖 所示

三：反應特征

1. 反應原料容易得到

2. 對于氧氣、水不敏感

3. 產率相對較高

4. 產物的立體選擇性好

西安齊岳生物提供如下幾類DBCO偶聯試劑

DBCO胺反應試劑和DBCO-PEG試劑：

DBCO-C6-NHS Ester           

DBCO-NHS Ester                 

DBCO-Sulfo-NHS Ester

DBCO-PEG4-NHS Ester            

DBCO-STP Ester

DBCO-PEG5-NHS Ester            

DBCO-PEG5-TFP Ester

DBCO Acid                    

DBCO-C6-Acid                  

DBCO-PEG5-Acid    

PC DBCO-NHS Ester  

DBCO Amine                   

DBCO-PEG4-Amine              

Sulfo DBCO-Amine  

Sulfo DBCO-PEG4-Amine

Bis-sulfone-PEG4-DBCO

DBCO Maleimide               

DBCO-PEG4-Maleimide    

Sulfo DBCO-Maleimide

Sulfo DBCO-PEG4-Maleimide

DBCO-PEG-MAL

DBCO-PEG-COOH

DBCO-PEG-NH2

DBCO-PEG-Biotin

DBCO-PEG-Silane

DBCO-PEG-SH

DBCO生物素反應試劑:

Biotin-PEG4-DBCO    

WS Biotin DBCO   

Dde Biotin DBCO

Disulfide Biotin DBCO  

Desthiobiotin-PEG4-DBCO   

Diazo Biotin DBCO  

PC DBCO Biotin   

DBCO-Sulfo-Link-biotin

Disulfide Biotin DBCO

Desthiobiotin-PEG4-DBCO

Diazo Biotin DBCO

PC DBCO Biotin

WS Biotin DBCO 

DBCO-Sulfo-Link-biotin

Diazo Biotin-PEG3-DBCO

Dde Biotin-PEG4-DBCO

PC DBCO-PEG3-biotin

WSPC Biotin-PEG3-DBCO

N-(DBCO-PEG4)-N-Biotin-PEG4-NHS

DBCO標記熒光探針

BCO-Cyanine3

DBCO-Cyanine3.5

DBCO-Disulfo-Cyanine3

DBCO-trisulfo-Cyanine3.5

DBCO-Cyanine5

DBCO-Cyanine5.5

DBCO-Disulfo-Cyanine5

DBCO-trisulfo-Cyanine5.5

DBCO-Cyanine7

DBCO-ICG

DBCO-trisulfo-ICG

AFDye 405 DBCO   

AFDye 430 DBCO     

AFDye 488 DBCO     

AFDye 532 DBCO     

AFDye 546 DBCO    

AFDye 555 DBCO     

AFDye 568 DBCO      

AFDye 594 DBCO     

AFDye 647 DBCO    

Cy3 DBCO           

Cy5 DBCO          

Cy5.5 DBCO        

Cy7 DBCO           

MB 488 DBCO       

MB 543 DBCO     

MB 594 DBCO     

MB 660R DBCO        

MB 680R DBCO        

TAMRA DBCO        

小分子DBCO產品：

DBCO-PEG4-NHS Ester

DBCO-PEG5-NHS Ester

DBCO-PEG5-TFP Ester

DBCO-PEG4-Amine

Sulfo DBCO-PEG4-Amine

Bis-sulfone-PEG4-DBCO

Biotin-PEG4-DBCO

Desthiobiotin-PEG4-DBCO

DBCO-PEG4-DBCO

DBCO-PEG4-OH

DBCO-C4-COOH

Sulfo DBCO-PEG4-Maleimide

DBCO-PEG4-Maleimide

DBCO-PEG5-Acid    

DBCO-C6-Acid

DBCO-NHCO-PEG13-acid

DBCO-PEG8-NHS ester

DBCO-PEG2-PFP ester 

DBCO-C2-alcohol

DBCO-C2-PEG4-amine

DBCO-C3-PEG4-amine

DBCO-PEG1-NH-Boc

Bromoacetamido-dPEG???-amido-DBCO

Biotin-dPEG???-DBCO

Bromoacetamido-dPEG???-amido-DBCO

m-dPEG???-DBCO

DBCO-dPEG???-amido-dPEG???-DSPE

DBCO-dPEG???-MAL

DBCO-dPEG???-TFP ester

DBCO-dPEG???-meso-TP-IR775

N-(DBCO-PEG4)-N-Biotin-PEG4-NHScas:2353409-72-8

N-DBCO-N-bis(PEG2-acid)    cas:2110449-00-6

N-DBCO-N-bis(PEG2-NHS ester)cas:2128735-29-3

DBCO-C6-Acidcas：1425485-72-8

DBCO-PEG5-Acidcas：1870899-46-9

DBCO Aminecas：1255942-06-3

DBCO-PEG4-Aminecas：1255942-08-5

DBCO Maleimidecas：1395786-30-7

DBCO-PEG4-Maleimidecas：1480516-75-3

溫馨提示：西安齊岳生物科技供應的所有產品僅用于科研，不能用于人體。axc