凝集素的熒光標記（Cyanine染料、熒光素FITC）
凝集素可作為組織化學的特異性探針廣泛用于光鏡的石蠟切片和冰凍切片、電鏡樹脂包埋超薄切片及冰凍超薄切片等標本的觀察。為使結合在細胞膜上單糖的凝集素呈現可視性。目前已有熒光素異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate，FITC)、辣根過氧化物酶和生物素、鐵蛋白、膠體金標記凝集素的組織化學染色。

橙黃網胞盤菌凝集素(AAL)是兩個相同亞單位的二聚體,每個亞單位約36kDa。與歐洲烏賊和蓮藕四角葉凝集素偏好(α-1,2)連接的巖藻糖殘基不同,枳實凝集素優先與巖藻糖連接(α-1,6)到N-乙酰葡萄糖胺或巖藻糖連接(α-1,3)到N-乙酰乳糖胺相關結構結合。AAL還可逆地結合巖藻糖與核酸

熒光素標記的*凝集素具有適當數量的熒光色素,為該凝集素提供*的染色特性。這種共軛物基本上不含未結合的熒光色素。激發峰值為495 nm,發射峰值為515 nm。

FITC標記凝集素的組織化學染色程序

1．組織切片經脫蠟處理，若是Bouin液固定的組織，用70％乙醇洗3次除去組織切片內的黃色后，再用蒸餾水漂洗；

2．PBS漂洗(含1％牛血清白蛋白)2次，每次5分鐘；

3．加入FITC-凝集素(PBS適當*釋)，置濕盒內孵育，室溫1小時；

4．PBS漂洗3次，每次5分鐘；

5．水溶性封片劑封片，熒光顯微鏡觀察。

6．結果 FITC標記的凝集素能直接與組織細胞內的糖基結合，從而顯示糖基的位置，可用于檢測組織細胞中的糖成分，陽性部位呈黃綠色熒光。

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