聚乙二醇修飾牛血清白蛋白(PEG-BSA)由西安齊岳生物提供。
西安齊岳生物提供酶HRP,熒光FITC,Biotin、Cy3、Cy5、Cy7、羅丹明等熒光物質(zhì)標(biāo)記蛋白,標(biāo)記位置是氨基,標(biāo)記的蛋白有:牛血紅蛋白、膠原蛋白、鏈霉親和素、大鼠免疫球蛋白、牛胎球蛋白、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、重組蛋白G等幾十種蛋白,提供檢測圖譜。
制備方法:
PEG修飾蛋白質(zhì)向2mgInl的BSA溶液(pH8.5,0.05mlIL的borate緩沖液配制)中加入一定量的CDID2MPEG ,BSA與CDID2MPEG 的摩爾比例為1 :60。 將以上溶液混合均勻,置于4 C下連續(xù)攪拌。72 h后,將反應(yīng)混合物在5 000 dhin下離心15 min ,以Amicon Sirred Cell 8200超濾器和截留相對分子質(zhì)量為30 000的YM30超濾膜(Millipore公司,美國)超濾除去小分子雜質(zhì)超濾體積為反應(yīng)體積的20倍。
PEG共價修飾BSA牛血清白蛋白/HAS人血清白蛋白/Tf轉(zhuǎn)鐵蛋白主要通過PEG末端羥基與蛋白質(zhì)氨基酸殘基反應(yīng)實現(xiàn),而PEG末端羥基活性很差,必須使用活化劑對其進行活化,才能在體內(nèi)溫和的條件下對蛋白質(zhì)進行共價修飾。
常用的PEG活化方法有:
(1)氰脲酰氯法:氰脲酰氯又名三氯化嗪(TST) 是對稱雜環(huán)化合物,David 等利用 TST 與聚乙二醇上的羥基反應(yīng) 只有一個氯原子被取代,其它的氯原子與蛋白質(zhì)的氨基反應(yīng)。
(2)光氣參與的活化方法:Kurfuerst 等在其專利中提到一些方法,分別用 N-羥基琥珀酰亞胺鉀鹽、硝基苯酚及三氯苯酚與光氣反應(yīng)制備活化聚乙二醇。活化主要分兩步如下圖所示。
(3)聚乙二醇對蛋白質(zhì)的半胱氨酸殘基的化學(xué)修飾,常見特異性修飾疏基的PEG活化方法
(4)酶法定點連接聚乙二醇:除了傳統(tǒng)的化學(xué)修飾方法,也可以通過其它途徑如酶催化來達到修飾的目的,以谷氨酰胺酶(G-TGase)為例。
最后,選擇合適的蛋白質(zhì)氨基酸殘基位點或小分子**位點進行定點修飾。用活化后的PEG對合適的蛋白質(zhì)氨基酸殘基進行定點修飾,從而改善天然蛋白質(zhì)的療效。
西安齊岳生物現(xiàn)貨產(chǎn)品:
Ferrocene-PEG-SH 二茂鐵-聚乙二醇-巰基
FITC-labeled PEG-SS-PCL
FITC-PAMAM-PEG
FITC-PAMAM-PEG-GE11
FITC-PEG-cRGD 熒光素-聚乙二醇-多肽
FITC-PEG-DPD 熒光素-聚乙二醇-脫氧吡啶
FITC-PEG-GO 熒光素-聚乙二醇-氧化石墨烯
FITC-PEG-PEI 熒光素-聚乙二醇-聚乙烯亞胺
Folate-PEG- g-TMC
folate-PEG-COOH 葉酸-聚乙二醇-羧基
Folate-PEG-DTPA
Folate-PEG-DTPA 靶向PEG**影像診斷
folate-PEG-heparin 葉酸-聚乙二醇-肝素
FOL-PEG-g-PEI-GAL 葉酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺-
Fol-PEG-PAsp-Hyd-ADR
G4-Ac-PEG
G5.NHAc-Chol-FI-PEG-FA
Galactosyl-PEG-MAL 半乳糖-PEG-馬來酰亞胺
GAL-PEG-NH2 半乳糖-聚乙二醇-氨基
Gal-PEG-PCL
GA-PEG-Chitosan,CTS-PEG-GA 殼聚糖-聚乙二醇-甘草次Glycyrrhetinic acid-PEG-Chitosan
GA-PEG-NHS/NH2/SH/MAL 甘草次酸PEG活性基團
GA-PEG-PBLA
GA–PEG–PBLG 甘草次酸-聚乙二醇-聚(γ-芐基L-谷氨酸)
GA-PEG-PEI-PLGA
GA-PEG-PHIS-PLGA