齊岳生物提供外泌體(Exosome)電鏡DLS/NTA粒徑分析表征電鏡測定服務(wù)
鍵詞:外泌體(Exosome),TEM透射電鏡,DLS/NTA 粒徑分析,電鏡DLS NTA,表征電鏡測定
外泌體表征電鏡測定技術(shù)簡介:
外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。密度在1.13-1.21g/ml,具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu),存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物液中。主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,包括幾乎所有類型的細(xì)胞(免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞),都可以產(chǎn)生并釋放exosome。目前外泌體提取主要有超速離心、過濾離心、試劑盒提取等方法。
實(shí)驗(yàn)流程
步驟一:外泌體戊二醛固定。
步驟二:清洗-用1mL PBS清洗3次,每次靜置15min。
步驟三:e酸固定-加入0.5 mL 2%e酸溶液 4度固定2h。
步驟四:清洗-用1mL PBS清洗3次,每次靜置15 min。
步驟五: 脫水-用50%、70%、80%、90%乙醇各1mL梯度脫水分別靜置15min,再用1mL **乙醇脫水2次,每次20min。
步驟六:置換-用1mL丙酮置換2次,每次靜置15min。
步驟七:浸漬。
步驟八:包埋-將樣品放入盛有純包埋劑的包埋板中。
步驟九:聚合-將包埋板置于65℃條件下聚合48h。
步驟十: 染色-醋酸雙氧鈾染色 10min后清洗;醋酸鉛染色 10min后清洗。
步驟十一:上機(jī)檢測。
步驟十二:提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
外泌體表征電鏡測定圖譜展示:
服務(wù)說明及結(jié)果
客戶提供:客戶提供外泌體樣本或由我司分離得到需要檢測的外泌體。
公司提供:基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)檢測周期:5-10個工作日。