熒光標記蛋白質的分布特點:
在用熒光技術檢測內源性蛋白質時*常用的方法就是免疫學方法,即先用特異性抗體(- -抗)識別靶蛋白,再用標記有小分子有機染料、藻膽蛋白或量子點的:抗顯色(圖1A至C)。
或者,也可以直接將熒光標志物或者生物素連接在一抗上,然后再用抗生物素蛋白鏈菌素檢測。
當把抗體直接注入細胞時或者為了對多個蛋自進行檢測而使用了多種顏色的熒光時采用這種直接將標志物連接在抗體上的方法非常**。但是如果沒有高質*的抗體時*好就是將熒光標志物與靶蛋白一起融合表達來檢測,盡管這種融合蛋白不能算真正意義上的“內源性蛋白”。
對靶蛋白檢測的**程度取決于一抗的特 異性,因此還需要用其它的方法進行佐證。
使用免疫熒光標記法的劣勢在于前而所述的,該方法只能用于經透化處理的細胞、胞外蛋白和可以被細胞內吞的蛋白,而且這些抗體標志物的多價性(multivalency) 還可能公導致靶蛋白形成寡聚體。
在標準的免疫標記法中,熒光標記的復合體通常米說分子量都會超過200KD,這有可能會影響到蛋白間的相互識別過程。
表1中列舉了幾種免疫標記法以及其它標記蛋白的技術。
西安齊岳生物提供酶HRP,熒光FITC,Biotin、Cy3、Cy5、Cy7、羅丹明等熒光物質標記蛋白,標記位置是氨基,標記的蛋白有:牛血紅蛋白、膠原蛋白、鏈霉親和素、大鼠免疫球蛋白、牛胎球蛋白、人轉鐵蛋白、胰島素、重組蛋白G等幾十種蛋白,提供檢測圖譜。
四甲基羅丹明-5(6)-馬來酰亞胺(混合物);
四甲基羅丹明-5-馬來酰亞胺(單一化合物);cas174568-67-3;
四甲基羅丹明-6-馬來酰亞胺(單一化合物);cas174568-68-4;
德克薩斯紅-X-琥珀酰亞胺酯;Texas red-X,SE
5(6)-羧基羅丹明110(混合物);5(6)-CR110
5-羧基羅丹明110(單一化合物);5-CR110
6-羧基羅丹明110(單一化合物);6-CR110
5(6)-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯(混合物);cas254732-34-8;5(6)-CR110, SE
5-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯(單一化合物);5-CR110, SE
6-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯(單一化合物);6-CR110, SE
5(6)-羧基羅丹明6G(混合物);5(6)-CR6G
5-羧基羅丹明6G(單一化合物);5-CR6G
6-羧基羅丹明6G(單一化合物);6-CR6G
5(6)-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯(混合物);5(6)-CR6G, SE
5-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯(單一化合物);5-CR6G, SE
6-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯(單一化合物);6-CR6G, SE
5(6)-羧基四甲基羅丹明(混合物);cas150347-56-1;5(6)-TAMRA
5-羧基四甲基羅丹明(單一化合物);cas91809-66-4;5-TAMRA
6-羧基四甲基羅丹明(單一化合物) ;cas91809-67-5;6-TAMRA
5(6)-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯(混合物);cas246256-50-8;5(6)-TAMRA, SE
5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯(單一化合物);cas150810-68-7;5-TAMRA, SE
6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯(單一化合物);cas150810-69-8;6-TAMRA, SE
以上資料來自小編zhn2022.03.11
溫馨提示:僅用于科研