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高密度環氧基磁珠 | 環氧基磁性微球(1微米)的使用說明書
發布時間:2023-06-21     作者:zhn   分享到:

高密度環氧基磁珠|環氧基磁性微球(1微米)

一、概述

環氧基磁性微球提供永久結合和固定各種含胺基、巰基配體。 珠子表面上的高密度環氧酸基團(Epoxy)可用于配體如蛋白質、肽和核酸的共價偶聯。 環氧基磁珠可用于共價偶聯胺、巰基或含羥基的配體。含羥基、胺和巰基的配體的偶聯分別在pH 11-13、pH> 9和pH 7.5~8.5下反應。不溶于水的配體可在50%有機溶劑(二甲基甲酰胺)中偶聯。PuriMag Homo-Epoxy包含短臂和長臂磁珠,都適用于蛋白質和多肽的偶聯。。

二、產品特性

1.       PuriMag HomoS-Epxoy短鏈羧基磁珠

基團密度> 400 umoles Epoxy/g beads

 

2.       PuriMag HomoL-Epoxy長鏈羧基磁珠

基團密度> 200 μmoles Epoxy/g beads

形態:超順磁球形

直徑:1μm

儲存:10 mg/mL ,去離子水中 2~8 °C保存,勿凍結。

常溫運輸,正確使用保存期一年。

 

三、偶聯方案

環氧基磁珠PuriMag Homo-Epoxy有利于小配體與磁珠的結合,包括但不限于單糖、肽和二糖。 它也可用于偶聯各種配體,如蛋白A、StrepTactin、枯草桿菌蛋白酶和免疫球蛋白。 如果配體負載量太低,可能會導致非特異性吸附過大;如果配體負載量過高,可能會造成空間位阻。因此,強烈建議優化每個單獨應用的磁珠用量。推薦用量一般為0.04~0.4 mg多肽/ mg磁珠。 以下實驗方案可相應放大和縮小。

 

A. 緩沖液

1) 偶聯緩沖液(Coupling Buffer): 0.1 M sodium carbonate buffer or 0.1 M sodium phosphate, pH 8.5-10;

注意:緩沖液的離子強度對于獲得更高的偶聯效率至關重要。 偶聯緩沖液應具有小的離子強度,并且不應含有任何氨基(例如Tris)、硫醇、羥基和酚。但洗滌或儲存緩沖液可含有氨基、硫醇、羥基和酚基團。

2) 封閉緩沖液(Blocking Buffer): 1 M ethanolamine, pH 9.0;

3) 洗滌緩沖液(Wash buffer): PBS, pH 7.4.;

 

B. 偶聯方法

注意:將環氧基磁珠按10mg/ml懸浮在50%丙酮中,劇烈渦旋分散磁珠并儲存在4 ℃。使用前混勻磁珠。

1. 將10mg磁珠轉移至EP管中。

2. 將EP管置于磁磁力架上1min,吸棄上清液,用1ml偶聯緩沖液重新懸浮磁珠。

3. 重復步驟2三次。

注意:一旦水化,應盡快使用磁珠。

4. 將適量的蛋白質或肽溶解在1ml偶聯緩沖液中。

注意:環氧基活化磁珠的偶聯效率因配體而異。用戶應根據經驗優化配體的濃度。推薦1-10 mg/ml用于蛋白質結合;對于小肽,配體濃度應超過200 umol/ml。

5. 將蛋白質溶液加入洗過的磁珠中,重懸磁珠并孵育。

注意:胺類配體如蛋白質在25 ℃下偶聯15~48 h。但是,如果配體對溫度非常敏感,可在4℃下偶聯至少48~72 h。肽、含羥基的配體例如碳水化合物或含巰基的配體在25~75 ℃下偶聯4~15 h。

6. 用1ml PBS緩沖液洗磁珠3次。

7. 將0.5~1ml封閉緩沖液添加至磁珠中,并在4℃下孵育至少4h或過夜。

8. 用1ml PBS緩沖液洗磁珠4-6次。

9. 用PBS緩沖液(0.1%疊氮化物)將磁珠重懸至所需濃度,儲存于2~8 ℃并避免凍結。

用途:科研

純度:≥95%

保存時間: 1年

產地:西安

供應商:西安齊岳創科生物科技有限公司

注意事項:僅用于科研不用于人體

 


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