伏馬菌素偶聯卵清蛋白半抗原(fumonisin-OVA,FB-OVA)成功合成!!!
西安齊岳生物科技有限公司是可以提供一些的蛋白(如OVA、BSA、HSA)偶聯藥物的定制合成服務。
伏馬菌素( fumonisin, FB)是一類主要由串珠鐮刀菌產生的真菌毒素。其中FB1是一種小分子物質,相對分子質量為721.8,是**的半抗原,雖然具有一定的反應原性,但沒有免疫原性,因此為了制備成完全抗原,必須將其偶聯到某種特定大分子蛋白載體上。齊岳生物實驗室成功合成伏馬菌素-卵清蛋白偶聯物(fumonisin-OVA)。
伏馬菌素-卵清白蛋白(簡稱FB-OVA)的偶聯主要采用戊二醛一步法,合成步驟如下:
稱取1.2 mg OVA,用PBS(0.01 M,pH 7.2)配制蛋白懸浮液,濃度為1 mg/mL,在磁力攪拌中用蛋白懸浮液溶解1 mgFB, ,并逐滴加入相同體積的戊二醛(2% ,體積分數比) ,室溫反應1 h,用硼氫化納終止反應,使硼氫化納的終濃度為10 mg/mL,室溫反應1 h。然后,在磁力攪拌條件下用PBS于4 C透析72 h。透析液經PEG20000濃縮后,使用考馬斯亮藍蛋白試劑盒檢測蛋白含量。
FB-OVA偶聯物的聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)檢測說明:
安裝制膠板,配制電泳所需各種溶液,選用濃度為12%分離膠,5%濃縮膠,樣品與上樣緩沖液4:1混合,上樣量每孔10 μL,濃縮電壓為80 V,分離電壓為120 V,考馬斯亮藍染液染色2 h,脫色過夜,拍照分析。
電泳圖中FB1-OVA的電泳條帶遷移率比OVA的遷移率小
質譜法檢測得出FB1-OVA和OVA的相對分子質量分別是51 928.612和44 265.718。
免疫芯片檢測可見偶聯物與FB1McAb發生了特異性反應,初步證明偶聯成功.
伏馬菌素-卵清蛋白(fumonisin-OVA)溶于PBS中,蛋白濃度≧5mg/ml,可作為抗原免疫動物用于抗體的制備,或包被于固相載體用于伏馬菌素及其抗體的檢測,也可用于自身免疫病研究和實驗動物自身免疫病模型的建立。
Stability: 12 months
Storage: -20°C in the dark
供應商:西安齊岳生物科技有限公司
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