ROS活性氧有哪些檢測方法？

1、電子順磁共振技術( electron paramagnetic resonance , EPR )

EPR是一種檢測自由基的波譜學方法, 是明確評估生物系統(tǒng)中以氧氣為中心的自由基生成的“金標準”。由于O 2?-,?OH 反應活性高、壽命短 EPR 信號不易直接檢出, EPR 與自旋捕獲技術( spin tranps ) 相結合可彌補這一缺陷。

2、熒光染色法

熒光探針通常對氧化劑敏感，并且在被氧氣氧化之前是非熒光性的。使用廣泛的成員是二氫乙啶（DHE），二氯二氫熒光素（DCFH-DA）和Amplex Red（盡管細胞不可滲透）。細胞可滲透的物質(zhì)有助于反映細胞區(qū)室的氧化狀態(tài)，提供有關刺激下自由基產(chǎn)生的信息。這些探針大多數(shù)通過單電子自由基機理被氧化，產(chǎn)生探針自由基中間體并產(chǎn)生熒光產(chǎn)物。

3、化學發(fā)光法

化學發(fā)光分析通常用于超氧化物的檢測。與熒光分析類似，化學發(fā)光探針對自由基敏感，易于操作。探針可以與O2?-形成光子， 并由光度計吸收計數(shù)器捕獲，而無需使用激發(fā)光光源。

4、色譜方法

色譜法用于羥基自由基及其反應產(chǎn)物的分離和鑒定。?OH與特定的試劑反應，生成可通過色譜分析檢測到的穩(wěn)定化合物，其中通常使用液相色譜及其與質(zhì)譜的組合。通常用于穩(wěn)定自由基的試劑是苯甲酸，水楊酸和DMSO。

5、分光光度法

6、電化學生物傳感器

7、電化學生物傳感器

基于熒光蛋白的氧化還原探針是通過熒光蛋白（FPs）和原核氧化還原敏感蛋白的組合而設計的。重組蛋白通過質(zhì)粒或腺病毒被引入細胞，并靶向亞細胞器，從而報告某些區(qū)域的氧化還原狀態(tài)。

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