熒光聚苯乙烯ps納米微球標(biāo)記物的制備方法

a、制備聚苯乙烯納米微球，并將其和帶有活性基團(tuán)的有機(jī)硅烷化學(xué)鍵合，形成表面帶有活性基團(tuán)的微球，具體為每100mLこ醇溶液中加入25g聚こ烯吡咯烷酮、1. 06g過硫酸鉀、10g苯こ烯，所述こ醇溶液中こ醇與水的體積為3:1，將配置好的每100mLこ醇溶液溶解后置于超聲波反應(yīng)器中，通氮?dú)馀懦w系中的氧氣，開啟超聲波發(fā)生器進(jìn)行聚合反應(yīng)，得到聚苯こ烯納米微球分散液，離心搜集聚苯こ烯納米微球，以5mL無水こ醇懸浮，加入5μ L氨基硅烷，攪拌反應(yīng) I小吋，以等體積無水こ醇洗滌后收集；

b、將熒光絡(luò)合物以化學(xué)鍵合摻雜于上述微球中，得到帶有熒光絡(luò)合物的微球，之后再以帶有活性基團(tuán)的有機(jī)硅在微球表面引入活性基團(tuán)，具體為將lmg/mL的BCPDA按等體積加入到氨基化納米微球懸浮液中,攪拌15min,離心收集，懸浮于50mmol/L的pH=7. 8磷酸鹽緩沖液中，加入等體積O. lmol/L的EuCl3溶液，避光攪拌反應(yīng)IOmin ;離心收集后懸浮于等體積無水こ醇溶液中，加入5 μ L氨基硅烷，攪拌反應(yīng)I小吋，以等體積無水こ醇洗滌后收集，即得到稀土熒光微球標(biāo)記物。

實(shí)施方法的原理：

將聚こ烯吡咯烷酮(PVP)、過硫酸鉀(KPS)、苯こ烯(St)加入到こ醇/水介質(zhì)中溶解后置于超聲波反應(yīng)器中，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下聚合反應(yīng)。反應(yīng)過程中維持反應(yīng)溫度為60°c。反應(yīng)一段時(shí)間后得到聚苯こ烯納米微球分散液。利用帶有活性基團(tuán)的有機(jī)硅烷在ニ氧化硅微球引入活性基團(tuán)，再將熒光物質(zhì)通過化學(xué)鍵合的形式固定于ニ氧化硅微球的表面，而后在微球表面以帶有活性基團(tuán)的有機(jī)硅烷再次引入活性基團(tuán)。

制備FITC熒光微球標(biāo)記物異硫氰酸熒光素(FITC)是ー種常用熒光素，在波長為490nm的激發(fā)光作用下，發(fā)出波長為520nm的熒光，呈現(xiàn)明亮的黃緑色。FITC的水溶性和醇溶性良好，其自身帶有異硫氰酸基，可以與氨基發(fā)生反應(yīng)，形成共價(jià)鍵。利用苯こ烯制備等材料制備聚苯こ烯納米微球內(nèi)核，以氨基娃燒在微球表面弓I入氨基，可將FITC標(biāo)記于微球表面,制得突光納米微球。

（1）制備氨基化納米微球?qū)?/span>25gPVP、0. 06gKPS，10gSt加入到IOOmLこ醇/水(體積為3:1)介質(zhì)中溶解后置于超聲波反應(yīng)器中，通氮?dú)馀懦w系中的氧氣，開啟超聲波發(fā)生器進(jìn)行聚合反應(yīng)。反應(yīng)過程中通循環(huán)水維持的反應(yīng)溫度為60°C，且保持恒定的功率300W和恒定的氮?dú)饬魉佟７磻?yīng)一段時(shí)間后得到聚苯こ烯納米微球分散液。離心搜集聚苯こ烯納米微球，以5mL無水こ醇懸浮,加入5 μ L氨基娃燒,室溫?cái)嚢璺磻?yīng)I小吋，以等體積無水こ醇洗滌后收集。

（2）制備稀土熒光納米微球?qū)?/span>FITC配制成lmg/mL的こ醇溶液，按等體積加入到氨基化納米微球懸浮液中，室溫避攪拌15min，離心收集，離心收集后懸浮于等體積無水こ醇溶液中，加入5 μ L氨基硅烷，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)I小吋，以等體積無水こ醇洗滌后收集，即得到穩(wěn)定的FITC熒光微球標(biāo)記物。

齊岳提供聚苯乙烯微球試劑列表：

乳膠聚苯乙烯微球    

聚苯乙烯乳膠微球    

帶負(fù)電聚苯乙烯微球    

紅色熒燈光聚苯乙烯微球    

徑聚苯乙烯微球    

微塑料顆粒/PS微球    

納米級單分散聚苯乙烯微球    

亞微米級聚苯乙烯微球    

氯甲基化聚苯乙烯微球/氯球    

羧基化的聚苯乙烯微球活化偶聯(lián)抗體或適配體    

聚苯乙烯-二乙烯基苯微球    

聚苯乙烯微球AMCPS    

聚苯乙烯交聯(lián)微球    

微米交聯(lián)聚苯乙烯微球    

環(huán)氧基聚苯乙烯磁性微球Epoxy/ps    

環(huán)氧基修飾聚苯乙烯磁性微球    

環(huán)氧基標(biāo)記聚苯乙烯磁性微球    

聚苯乙烯磁性微球耦聯(lián)環(huán)氧基    

聚苯乙烯磁性微球標(biāo)識環(huán)氧基    

單分散聚苯乙烯PS微球    

PS聚苯乙烯單分散微球    

氨基聚苯乙烯磁性微球NH2/ps    

NH2/ps氨基修飾聚苯乙烯磁性微球    

氨基標(biāo)記聚苯乙烯磁性微球    

聚苯乙烯磁性微球耦聯(lián)氨基    

聚苯乙烯磁性微球標(biāo)識氨基    

硅醇基聚苯乙烯磁性微球SiOH/ps    

聚苯乙烯修飾/偶聯(lián)/標(biāo)記硅醇基磁性微球    

單分散聚苯乙烯熒光微球    

熒光聚苯乙烯單分散微球    

綠色聚苯乙烯熒光微球    

紅色色聚苯乙烯熒光微球    

橙色聚苯乙烯熒光微球    

苯肼基修飾的聚苯乙烯微球    

磺酸基修飾的聚苯乙烯微球    

聚苯乙烯熒光微球（FITC or RB）紅色 橙色 綠色    

BSA/蛋白連接聚苯乙烯    

氨基羧基功能化聚苯乙烯微球(PS微球)     

小編：wyf  06.22