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多功能單分散聚苯乙烯核/二氧化硅外殼粒子(SiO2@PS)
發布時間:2021-06-17     作者:wyf   分享到:

多功能單分散聚苯乙烯核/二氧化硅外殼粒子(SiO2@PS)

微球分析通常建立在聚苯乙烯顆粒上。該聚合物載體可用有機染料編碼,具有理想的低密度、高折射率等材料特性,可用于細胞檢測。然而,官能團通常在聚合過程中集成,隨后的修飾僅限于這些基團的反應性。

此外,聚苯乙烯作為核心材料,即使在功能化后,珠子表面仍然存在許多疏水區域,使得粒子在使用過程中容易發生非特異性吸附。后者需要幾個洗滌步驟,并在(生物)分析分析中使用添加劑。展示了如何通過使用單分散聚苯乙烯核/二氧化硅外殼粒子(SiO2@PS)來克服這些限制。

將兩種不同疏水的BODIPY(硼二吡咯亞甲基)染料以不同濃度包裹在聚乙烯吡咯烷酮(PVP)穩定的聚苯乙烯核中,在流式細胞儀的兩個獨立的檢測通道中形成5股陣列。隨后用等摩爾APTES/PEG(氨基丙基三乙氧基硅烷/聚乙二醇硅烷)共混物對二氧化硅殼進行改性,只需一步就能為雜化核殼微球增加多功能特性。

檢測原理

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使用染料編碼的微球和間接信號產生的CS顆粒分析的原理:(1)混合和孵育;(2)流式細胞術讀取和解碼微球。

  APTES為咖啡因衍生物(作為半抗原)提供了附著的氨基,從而創建了抗原偶聯微球;PEG部分**地**了抗體的非特異性結合,使表面具有防污性能。這是一種簡單的、免洗的、潛在的多重免疫化學檢測方法。信號的產生依賴于攜帶CAFHCS微珠和樣本中的分析物之間的競爭反應,以獲得各自的一次抗體(Pab)。因為采用了間接分析的形式,所以添加了染料標記的二抗(SAB),它與珠子上的PAb結合。所有試劑混合在一個隔間中,不需要額外的洗滌步驟,并產生競爭性的分析反應。使用流式細胞術進行信號讀出,可以從本質上區分珠相關熒光與背景信號,即從未結合的標記SAB中區分出來。以此方式,無需洗滌即可檢測分析響應,因為**地**了蛋白質(例如初級或檢測抗體)與攜帶APTES/PEG的設計微珠表面的非特異性結合。

實驗結果

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1  在相應的解碼通道中用于功能化的綠色編碼(ab)和紅色編碼(cd)CS珠的門控和彩色直方圖和散點圖

用二氧化硅包裹摻雜的PS核心粒子沒有不良影響,綠色編碼的5-plex CS粒子陣列可以用流式細胞儀檢測到。在熒光直方圖(FL1-HFL4-H)以及FL1-HFSC-H之間的相關圖中,所有粒子群都可以很好地分辨出來。

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2  G2/R2(包覆前)G2/R2-CS(包覆后)粒子的熒光光譜。

總的光譜特征,如帶寬和主要譜帶形狀沒有改變,表明染料在高度堿性條件下的二氧化硅包覆過程中保持完好。

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3  粒子活化(1)在甲醇/鹽酸中的示意圖,僅用一元APTES的官能化(2a),以及二元APTES/PEG共混物(2b)CAFH的偶聯(3)

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磁性微球 二氧化硅磁性微球 表面基團(NH2/COOH/Epoxy/SiOH) 粒徑(0.1-5μm)

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聚苯乙烯磁性微球 表面基團(NH2/COOH/EpoxySiOH) 粒徑(0.5-5μm)

三氧化二鐵磁性微球 表面基團(氨基/羧基/環氧基/硅醇基/鏈霉親和素) 粒徑(0.1-5μm)

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紅色/橙色/綠色二氧化硅熒光微球  大發射波長680 nm-505 nm  

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彩色乳膠微球 紅色乳膠微球  粒徑100nm-700nm 1.0μm-10.0μm  

藍色乳膠微球  粒徑100nm-700nm 1.0μm-10.0μm  

黃色乳膠微球  粒徑100nm-700nm 1.0μm-10.0μm  

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小編:wyf  06.17

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