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產(chǎn)品名稱:8arm-PEG-Biotin,八臂聚乙二醇生物素
1. 分子結(jié)構(gòu)與特性
核心設(shè)計(jì):
八臂星形結(jié)構(gòu):中心為季戊四醇(5-羥基核心)或甘油簇,連接8條PEG鏈(分子量2kDa-20kDa)。
末端功能化:每條PEG鏈末端通過(guò)活性酯(如NHS)或點(diǎn)擊化學(xué)偶聯(lián)生物素,取代度≥95%(通過(guò)紫外分光光度法或HPLC驗(yàn)證)。
物理化學(xué)特性:
多價(jià)效應(yīng):8個(gè)生物素分子可同步結(jié)合鏈霉親和素(SA,Kd≈10?1? M),顯著增強(qiáng)結(jié)合穩(wěn)定性。
空間位阻調(diào)控:PEG鏈長(zhǎng)影響生物素與SA的結(jié)合效率(長(zhǎng)鏈減少空間位阻)。
生物惰性:PEG鏈屏蔽非特異性吸附,延長(zhǎng)體內(nèi)循環(huán)時(shí)間。
穩(wěn)定性:
水解敏感性:PEG鏈在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定,生物素-PEG連接鍵需避免酸性條件(如pH<5)。
氧化敏感性:需避光儲(chǔ)存,防止生物素噻吩環(huán)氧化。
2. 核心合成策略
多臂PEG合成:
引發(fā)劑選擇:使用八羥基季戊四醇或甘油簇作為核心。
PEG鏈生長(zhǎng):通過(guò)陰離子開環(huán)聚合(如甲氧基PEG-OH)或點(diǎn)擊化學(xué)(如疊氮-PEG與炔基核心反應(yīng))構(gòu)建8臂結(jié)構(gòu)。
純化:超濾(MWCO=10kDa)去除未反應(yīng)PEG。
生物素偶聯(lián):
活化PEG末端:將PEG-OH轉(zhuǎn)化為NHS活性酯(如EDC/NHS催化)。
生物素反應(yīng):加入生物素-NH?(過(guò)量5%-10%),pH 8.5-9.0條件下反應(yīng)過(guò)夜。
純化:透析(截留MWCO=3.5kDa)或離子交換色譜去除未反應(yīng)生物素。
溫馨提示:僅用于科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!wyh
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