傳統的抗**方法具有很強的毒副作用，新型的**預防**癥方式是通過誘導宿主免疫反應特異性清除**細胞。一方面，通過體液免疫產生的大量抗體可以中和**細胞，從而在**癥預防中發揮重要作用。另一方面，細胞免疫誘導產生的細胞毒性T淋巴細胞（CTL）具有直接裂解**細胞的能力，這是**的**性**癥疫苗的必要條件。但是**性**癥疫苗往往難以達到理想療效，因為免疫系統已經對利用自身抗原偽裝的**細胞產生了耐受。針對這個問題，有課題組開發了一種新的**衍生磁小體作為一種高性能的**癥疫苗。該磁小體以尺寸均勻，具有高超順磁性和磁化強度的Fe3O4磁性納米團簇(MNCs)作為核心，然后Toll樣受體激動劑CPG-ODN(C)通過靜電相互作用吸附于該磁性納米團簇表面形成C-MNCs，然后利用提取的疊氮化修飾過的**細胞膜(M)包裹吸附Toll樣受體激動劑的磁性納米團簇形成M/C-MNCs，二苯并環辛炔修飾的抗CD205(A)對磁小體表面的**細胞膜進行進一步修飾，合成了一種高性能的**癥疫苗A/M/C-MNC。該磁小體的高磁化強度有利于對其進行磁控制，延長其在淋巴結的停留時間，同時其高超順磁性有利于核磁成像(MRI),以便實時監測其在淋巴結的動態分布。同時這種高性能的磁小體疫苗A/M/C-MNC可能會優先被CD8+樹突狀細胞識別，這些CD8+樹突狀細胞具有MHCI交叉呈遞和激活CD8+T細胞的能力，因此大量的T細胞以很大的克隆多樣性和細胞毒性進行增殖，即引起機體強烈的細胞免疫反應，進行**癥的免疫**。

構建的A/M/C-MNC**癥疫苗在五個不同的**模型上系統地證明了**的預防和**作用，并且幾乎沒有異常，可以滿足臨床的各種要求。

1、為了驗證其在體內的應用過程，對構建所得的A/M/C-MNC進行了系統表征，如圖1所示：

圖1D、E分別表示MNC，CpG-ODN，膜和抗CD205彼此完全共定位，粒徑逐漸增大，表明這四個組件已成功組裝，圖1F表明存儲了兩周的A/M/C-MNC的大小和ζ電位沒有明顯變化，表明了其具有良好的穩定性。

2、對組裝成功的磁小體在淋巴結停留的時間進行了研究

通過Dir標記膜成分，來研究磁小體在淋巴結停留的時間，圖2顯示在施加一個磁場(m)后，淋巴結中的熒光信號得到一個明顯的改善，與MF相比A/M/C-MNC(m)可以保留更長的的時間，達到3周以上，且保留半衰期延長了5.99倍（圖2C），并且面積曲線下的曲線也顯示增加了48.1倍（圖2D），通過器官切除、核磁成像(MRI)等多種手段證明了磁控制延長了其在淋巴結的停留時間。后續實驗都將連續施加21天的磁場控制。

圖2H、I、J證明了A/M/C-MNC具有良好的CD8+DC靶向性，通過磁控制，A/M/C-MNC(m)組中CD8+ DC的磁小體吸收量高。

3、評估淋巴結中T細胞的增殖與激活

淋巴結生長遵循與MHC表達相同的順序，通過PBS，MF，M/MNC，M/C-MNC，A/M/C-MNC和A/M/C-MNC(m)組別淋巴結的重量間接反映出T細胞的激活與增殖，與PBS組相比，A/M/C-MNC(m)組淋巴結的重量增加了約12.5倍，同時高通量測序表明增殖的T細胞顯示出很大的克隆多樣性，具體檢測結果見圖3，這種多抗原反應可以克服**進化過程中免疫逃逸的局限性。

4、活體抑瘤實驗

通過磁控制，A/M/C-MNC(m)組的淋巴結停留時間顯著延長。觀察到，在第5天強勁擴張和在淋巴結中的持續時間延長致4周(圖3F)，這可以進一步增強針對**癥的**效果，和預計結果一樣，**生長率以PBS，MF，M/MNC，M/C-MNC，A/M/C-MNC和A/M/C-MNC(m)的順序降低, A/M/C-MNC(m)組的小鼠生存期**延長，在與抗PD-1(ap)聯合**中，小鼠甚至在80天后仍然存活,如圖4所示。

5、A/M/C-MNC(m)疫苗記憶效應的探索

通過建立**轉移模型來研究不同磁小體制劑對**轉移的**作用，(A/M/C-MNC(m))組別與PBS組相比在組織學上未觀察到轉移灶，表明肺轉移得到了完全**（圖5D）。然后，添加抗PD-1(ap)的((A/M/C-MNC(m)+aP)可使小鼠在80天后達到100％的存活率。通過**復發模型的研究可知，與表現出全身復發的PBS組相比，接種A/M/C-MNC疫苗可**原發部位復發性**的生長，并且在其他部位則未觀察到轉移信號。在A/M/C-MNC(m)組中可以觀察到更好的結果。研究磁小體疫苗的記憶效應，利用建立的合適的動物模型證明了用A/M/C-MNC(m)+ aP方案**后具有**的免疫記憶作用。

西安齊岳生物科技有限公司可以提供推出一系列二維納米材料：Mxene、過渡金屬碳化物和氮化物（MXenes）、MAX相陶瓷材料;也提供MXene-氧化石墨烯、二維過渡族金屬碳(氮)化物與納米顆粒復合材料、聚合物插層改性MXene/MAX材料、無機非金屬插層MXenes基復合材料、金屬氧/硫化合物插層MXenes基復合材料等一系列定制合成產品。

相關產品

氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾AuNCs 金納米團簇

阿霉素軛合葉酸修飾金納米團簇

氨基酸修飾金納米顆粒/納米團簇

賴氨酸/精氨酸修飾金納米顆粒/納米團簇

聚乙二醇包覆金納米團簇AuNCs-PEG

二氧化硅包裹金納米團簇

卵清蛋白修飾金納米團簇OVA-AuNCs

中空磷參雜二硒化鈷納米團簇修飾的碳納米片

胞嘧啶和腺嘌呤耦合寡聚核苷酸序列定制DNA-AgNCs

BSA-Au20NCs熒光探針

單分散的Ni-La-B非晶態合金納米團簇

C_（60）原位修飾金屬納米團簇雜化材料

納米金團簇修飾電極

Au13簇/Au8簇

Fe3O4納米團簇包覆氧化硅(SiO2)Fe3O4@SiO2粒子

殼聚糖-接枝-聚（L-賴氨酸）樹枝狀大分子的金納米團簇

手性鈦氧納米團簇負載MOF(HKUST-1)有機框架

單鏈DNA修飾兩種不同熒光的金納米簇（Au NCs）

五肽保護金納米團簇

蛋氨酸/多肽保護的**細胞特異性熒光金納米團簇

金銀合金納米團簇

多元單層修飾的金納米團簇（Au-MMPCs）

單分子修飾金納米團簇(Au-MPCs)

功能化多肽修飾納米金簇

紅細胞膜包覆的金納米團簇/豌豆蛋白復合納米顆粒(AuNCs/PPI@RBC)

zzj 2021.2.24