吉姆薩染色原理
吉姆薩染液是由天青與伊紅組成。各種細胞成分化學性質不同,對各種染料的親和力也不一樣。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結合,被染成粉紅色;嗜堿性顆粒如細胞核蛋白或淋巴細胞胞漿為酸性物質,與堿性染料美藍或天青結合,被染成紫藍色;中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合,呈淡紫色。各類成分由于自身特性與吉姆薩染液中不同物質結合呈現不同顏色從而得以區分。吉姆薩染色液可將細胞核染成紫紅色或藍紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現出清晰的細胞染色圖像。
染液配制
吉姆薩(Giemsa'sstain;天青-伊紅)染色
1、吉姆薩染料是伊紅(AzurIIEqsin) 和天青(藍)2號合成的。
2、吉姆薩染料(Giemsa,天青-伊紅)染液配制:
吉姆薩染料(粉末) 0.5g 或 7.5g
甲醇( AR ) 33ml 或 500ml
甘油( AR ) 33ml 或 500ml
先將吉姆薩染料放入乳缽中,逐漸倒甘油研磨溶于甘油中,置于 56℃水溫箱內,90~120分鐘,然后加入甲醇,搖勻后放置數天,過濾后或不過濾即可使用。保存于棕色瓶中。一般兩周后使用為好。臨用時將貯備液與 pH 6.8的磷酸緩沖液按照 1:20混合。
染色步驟
1、將制備好的細胞涂片放置染色架上,滴加稀釋好的染色液使其覆蓋全部血膜,室溫染色15~30min。
2、用自來水緩慢從玻片一端沖洗 (注意勿先倒去染液或直接對血膜沖洗 ),晾干后鏡檢。
注意事項:
1、請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2、如果染色過濃或者過淡,請自行調整染色時間或吉姆薩工作液濃度。
3、原液稀釋后可能會出現少量沉淀,不影響使用;染色結束用水洗凈即可。
4、吉姆薩原液采用常規方法配制并用濾紙過濾,請在使用時不要接觸到水。否則時間長了會失效。
5、PH對細胞染色有影響。染色用載玻片必須清潔,無酸堿污染以免影響染色結果。
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以上內容來自小編zzj 2021.1.22