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小鼠體內光學成像的原理和實驗步驟-齊岳生物
發布時間:2020-07-08     作者:zhn   分享到:

小鼠體內光學成像的原理和實驗步驟-齊岳生物


西安齊岳生物科技有限公司整體動物實驗服務,動物造模實驗,動物體內光學成像,實驗動物飼養及造模服務、細胞周期測試、細胞凋亡測試、藥動學實驗外包方面有豐富的經驗。提供多種小鼠,大鼠,兔子等動物的活體成像,為您定制**的實驗方案。


活體動物體內光學成像主要采用生物發光與熒光兩種技術。生物發光是用熒光素酶基因(Luciferase)標記細胞或DNA,而熒光技術則采用綠色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等熒光報告基因和FITCCy5Cy7等熒光素及量子點(quantumdotQD)進行標記。


一、活體動物體內光學成像技術主要有種標記方法

生物發光

1.熒光素酶基因標記

熒光素酶基因(Luciferase)標記細胞或DNA

 

熒光發光

1.熒光蛋白標記

熒光蛋白適用于標記細胞、病毒、基因等,通常使用的是GFPEGFPRFPDsRed

2.熒光染料標記

熒光染料標記和體外標記方法相同,常用的有Cy3Cy5Cy5.5Cy7,可以標記抗體、多肽、小分子藥物等

3.量子點標記

量子點作為一類新型的熒光標記材料,其在長時間生命活動監測及活體示蹤方面具有獨特的應用優勢。


二、
小鼠體內光學成像的原理:

小動物活體成像技術是采用高靈敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和圖像處理軟件,使得可以直接監控活體生物體內的細胞活動和基因行為。通過對同一組實驗對象在不同時間點進行記錄,跟蹤統一觀察目標(標記細胞及基因)的移動及變化。操作簡單、所得結果直觀、靈敏度高,已廣泛應用于生命科學、醫學研究及藥物開發等發面。**學領域:建立**模型,通過活體成像技術可以測量**的生長、轉移以及對藥物的反應,使**學更接近臨床的發病的微觀環境。相比傳統方法,不僅靈敏度提高(檢測到微小**病灶),而且適合于**體內生長的定量分析,避免由于宰殺老鼠而造成的組間差異。藥物研究:通過活體成像技術可研究與藥物代謝有關的基因,藥物作用通路以及藥物的靶向臟器和體內分布規律。

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三、服務流程
1、制作動物模型
2、細胞標記或動物標記
3、活體成像
4、數據處理


四、提供一種小鼠活體成像實驗步驟:
1).SPFBALB/C裸鼠,68 周齡,1820克,實驗前24 h 自由進食、飲水。
2)
.于實驗裸鼠腹腔內注射2%戊巴比妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉動物。將裸鼠俯臥位平放于小動物多光譜活體成像系統的記錄暗箱中。實驗時將Cy7Cy7標記的生物分子或藥物溶于水(或甲醇/乙醇/乙二醇,有時DMSO 200uL能把小鼠殺死)稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL(濃度0.5 mg/mL)[用量和時間需要客戶根據自己的儀器和藥物試劑等條件優化]。每5min 記錄1 張動物在體內發射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對照鼠不注射藥物,進行同時記錄。記錄結束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器,進行成像。
3)
.Cy7 檢測時激發波長700770 nm帶通,發射波長790 nm長通。液晶可調諧濾光片掃描范圍 780950 nm,掃描步進10 nm。曝光時間為500 ms

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結果說明:不同的藥物代謝時間不一樣,注射入裸鼠體內,熒光立即分布全身,然后逐步向膀胱聚集,呈現**的腎排泄的特點一般46小時,快的只有30分鐘;如果是骨骼和鼻腔等部位靶點的Cy7標記藥物,有客戶反映一周后活體成像系統仍能檢測到熒光成像。器官切片觀察:將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4小時以上,0%20%30%PBS蔗糖依次沉底,20μm切片,多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片,晾干,DAPI染色。共聚焦顯微鏡觀察,激光器為氦氖 633 nm


西安齊岳生物提供以下定制服務項目列表:

藥物代謝動學參數分析

大小鼠高脂血癥模型造模

大小鼠I型糖尿病模型造模

大鼠脊髓損傷模型造模

肝細胞代謝穩定性試驗

基因芯片分析

藥代體外的吸收、分布、代謝和排泄研究

藥動代謝物鑒別/分析

細胞誘導/分化實驗外包

血漿動力學檢測

組織分布研究

細胞毒性實驗

細胞增殖與活性實驗

創傷性關節軟骨損傷修復動物模型基因敲除技術

藥代動力學體外安全性評價

血漿蛋白結合率測定

血漿穩定性試驗

肝微粒體代謝試驗

●CYP450**試驗

●CYP450誘導試驗

代謝產物推測

代謝產物確證

代謝途徑的推測

代謝途徑的確證

跨膜轉運試驗

藥物-藥物相互作用

代謝表型研究

環孢素mPEG-PLGA嵌段共聚物膠束在大鼠體內的藥代實驗外包

對乙酰氨基酚在大鼠體內藥物代謝動力學實驗外包

丹酚酸B單體在正常大鼠和高脂血癥大鼠體內的藥代外包

熱毒寧注射液在大鼠體內的藥代動力學外包

梔子苷單體在大鼠體內的藥代動力學外包

水飛薊賓口服亞微乳劑在大鼠體內的藥動外包

●18α-甘草酸二銨對格列本脲在實驗性糖尿病大鼠體內藥代實驗

奈韋拉平納米混懸液在小鼠體內的藥代實驗外包

氟比洛芬微乳在大鼠體內的藥物代謝動力學實驗外包

半乳糖神經酰胺脂質體包封的齊多夫啶(azidothymidine,AZT)在小鼠體內的藥代外包

克拉霉素對替硝唑在大鼠體內的藥代動力學外包

奧沙利鉑聚乙二醇修飾脂質體在大鼠體內的藥代實驗

京尼平苷酸(GPA)在膽汁淤積型大鼠體內的藥代外包

小檗堿(BBR)在大鼠血漿內的藥代動力學實驗外包

●8-十六烷基小檗堿(8-BBR-C16)在大鼠血漿內的藥動外包

奧硝唑(ONZ)在重癥急性胰腺炎(SAP)小鼠體內的實驗外包

奧硝唑(ONZ))小鼠體內的藥動實驗外包

●(modafinil,MOD)在小鼠體內的藥動參數檢測

葛根芩連湯中小檗堿在糖尿病模型大鼠體內的藥代參數檢測

酮洛芬(KPF)脂質體凝膠在大鼠體內的藥代外包

金森腦泰注射液(CBN)中葛根素在正常大鼠體內的藥動外包

金森腦泰注射液(CBN)中人參皂苷 Rg1在正常大鼠體內的藥動參數檢測

川芎嗪醇質體貼片在大鼠體內的藥代動力學實驗外包

●(modafinil,MOD)在小鼠體內的藥動參數檢測

氨溴索對多索茶堿(DP)在大鼠體內的藥代參數檢測

齊墩果酸納米脂質體在大鼠體內的藥代實驗外包

口服丁香酚在大鼠體內的藥代動力學實驗外包

四神丸水煎液中補骨脂素和異補骨脂素在大鼠體內的藥動實驗外包

乳糖化-去甲斑蝥素納米粒在大鼠體內的藥代參數檢測

磷酸咯萘啶在小鼠體內的藥物代謝動力學實驗參數檢測

鹽酸奧昔布寧凝膠劑與片劑在大鼠體內的藥代外包

五柴顆粒中五味子在小鼠體內的藥動外包

黃連-吳茱萸配伍中鹽酸小檗堿在大鼠體內的藥代參數檢測

塞來昔布納米混懸劑(CXB-NSs)在大鼠體內的藥動外包

原兒茶酸在大鼠體內的藥物代謝動力學外包

康艾注射液和苦參素注射液在大鼠體內藥動學外包

馬兜鈴酸在大鼠體內藥代學外包

內脂質體干擾素在小鼠體內藥代動力學外包

鹽酸戊乙奎醚在小鼠體內藥物代謝動力學外包

天麻素在大鼠體內藥動學研究外包

綠原酸在大鼠體內的藥代學實驗外包

黃芩苷在大鼠體內的藥動學研究外包

●(ephedrine,E)在小鼠體內藥代動力學研究外包

銀杏葉提取物含藥血清在大鼠體內藥動外包

脾虛癥大鼠甘草甜素的藥動外包

芒果苷自微乳給藥系統在大鼠體內的藥代實驗

替莫唑胺固體脂質納米粒在小鼠體內藥動實驗

甲氨蝶呤紅細胞載體在大鼠體內藥代實驗

環孢素固體分散體在大鼠體內藥動實驗外包

●3-O-蕓香糖苷在大鼠體內藥代動力學參數檢測

白芍總苷在免疫性肝損傷小鼠體內的藥代實驗

大川芎方多元釋藥系統在小鼠體內的藥動參數檢測

殼聚糖包覆左旋多巴脂質體凍干制劑在大鼠體內的藥動實驗外包

西咪替丁對大鼠體內的藥代動力學參數檢測

低氧與常氧狀態下羅紅霉素在大鼠體內的藥代外包

鹽酸阿霉素殼聚糖納米粒在大鼠腦內藥代動力學外包

低分子量肝素凝膠對瘙癢模型小鼠的藥代參數檢測

芹菜素囊泡在小鼠體內的藥代動力學實驗外包

重組水蛭素在大鼠體內藥物代謝動力學外包

鹽酸川芎嗪(TMP)經大鼠鼻腔給藥后的腦內藥動實驗

知母皂苷B-IISD大鼠體內的藥代實驗參數檢測

吳茱萸堿脂質體在大鼠體內的藥代

冬凌草甲素在小鼠體內的藥動

大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒在小鼠體內的藥動外包

膽固醇-半乳糖配體介導的多烯紫杉醇脂質體大鼠體內藥代外包

紫杉醇納米混懸劑在大鼠體內的藥動實驗外包

淡豆豉中異黃酮成分在大鼠體內的藥代參數檢測

黃芩素在大鼠體內的藥代動力學實驗外包

苦參堿在大鼠體內的藥物代謝動力學外包

尼莫地平前體脂質體在小鼠體內的藥代參數檢測

鹽酸伊立替康納米粒(irinotecan hydrochloride nanoparticles,CPT-11NPs)在大鼠體內的藥代參數檢測

溫馨提示:西安齊岳生物供應的化學試劑、納米材料、藥動學外包產品僅用于科研,不能用于人體


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